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盘点免疫层析常用标记微球

发布时间:2022-05-25 09:40:26     来源:     点击量:

  来源:体外诊断IVD知识库, IVD原料网

  标记原料的发展

  随着材料学的发展,各种标记物相继出现,目前,常见的标记物有胶体金、彩色微球、荧光微球、时间分辨荧光微球、磁性微球及量子点,实现了免疫层析定性至定量检测的转变,并进一步提高了免疫层析试纸的灵敏度、特异性。接下来,为大家做一下盘点!

  01  胶体金标记

  优点:几乎可以标记所有的蛋白分子,使用方便,成本低;检测结果直观,肉眼可观察,不需要特殊的仪器设备。

  缺点:胶体金产品批间差异较大,灵敏度低;采用物理吸附的方法结合,抗原/抗体容易从金颗粒表面脱离,标记物不稳定;只能给出定性或者半定量结果。

  02  彩色微球标记

  优点:色彩鲜艳而丰富,彩虹系列色彩均可调整,可实现多重检测;粒度均一、单分散性好、检测结果可重复性强;检测结果直观,肉眼可观察,使用方便;与免疫层析用胶体金相比,灵敏度更高。

  缺点:只能给出定性或者半定量结果。

  03  荧光微球标记

  优点:荧光微球具有相对稳定的形态结构,粒度均一、单分散性好、偶联效率高、发光效率高;可进行定量检测且检测结果重复性好;有较好的生物相容性且基本不受外界环境变化的影响。

  缺点:荧光微球的价格略高于彩色微球的价格。

  04  时间分辨荧光微球标记

  时间分辨荧光微球内部包埋稀土-镧系元素(如Eu3+、Tb3+、Sm3+、Dy3+),镧系元素螯合物在紫外光源的激发下能发射特殊的荧光。时间分辨荧光免疫层析技术(TRFIA)是以微球作为标记物,标记抗原、抗体等物质,利用时间分辨荧光分析仪,确定待测抗原、抗体的量。

  TRFIA与化学发光、电化学发光免疫检测技术并称为三大超灵敏检测技术,在食品检测、医学临床检测、生物学科研检测以及环境检测等方面有较为广泛的应用。

  优点:与普通荧光相比,具有Stocks位移大,荧光寿命长等特点,可以有效避免样品中的本底荧光,以及激发光等杂散光的影响,因此相比普通荧光具有更高的灵敏度和抗干扰能力。

  缺点:仪器设备要求和成本相对较高。

  05  磁性微球标记

  优点:传统的试纸检测时,最多只能检测膜表面10um以内的信号,而膜的厚度通常有几百微米,因此90%以上的标记物难以被有效检测到。而利用磁场测定仪则可以测定到层析膜上包括膜表面和不能被光学仪器有效检测到的膜深层的顺磁颗粒信号,灵敏度得到提高。待测物和免疫层析试纸条中除磁性微球外的材料基本上不含有磁性物质,本底干扰和其它干扰非常小,有利于提高检测的正确性和可重复性。

  缺点:利用磁性微球标记建立的快速检测技术需要用外界磁场,较为麻烦。

  06  量子点标记

  优点:荧光强度高,抗漂白能力强;发光颜色多样;可以减弱甚至消除背景荧光的干扰,量子点波普范围宽,单一波长激发光、一个波段的光谱或整个激发光源均可激发量子点,使其在整个可见区域产生一个波普比较窄的荧光。

  缺点:量子点和某些蛋白质结合后可能导致量子点的荧光减弱或淬灭,并且检测时需要用紫外光作为激发光,操作程序稍显复杂,仪器设备要求和成本都较高。

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